Nourseothricin Sulfate諾爾絲菌素/鏈絲菌素鹽NTC
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別名:諾爾絲菌素鹽;諾爾絲菌素;Streptothricin Sulfate;Nourseothricin Sulfate
簡(jiǎn)介:諾爾斯菌素(Nourseothricin,縮寫(xiě)NTC),英文同義名Streptothricin和clonNAT,由諾爾斯氏鏈霉菌( Streptomyces noursei)代謝產(chǎn)生的一種廣譜型抗生素,因結(jié)構(gòu)上具鏈絲菌素(Streptothricin,STs)化學(xué)基團(tuán),故歸屬于此類(lèi)抗生素亞家族。天然產(chǎn)物提取的諾爾斯菌素(Nourseothricin)一般為ST-F和ST-D的混合物,具有極其寬廣的抑制生長(zhǎng)活性,原核生物如細(xì)菌;真核生物如包括白色念球菌在內(nèi)的各種酵母菌、絲狀真菌、原生生物、昆蟲(chóng)和植物。諾爾斯菌素的作用機(jī)制是通過(guò)誘導(dǎo)mRNA錯(cuò)誤編碼,來(lái)抑制蛋白合成。
基于以上特性,諾爾斯菌素(Nourseothricin)是基因重組工程研究中非常的選擇性抗生素??剐曰?/span>nat1初從S. noursei分離所得,此基因能編碼表達(dá)諾爾斯菌素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶,通過(guò)對(duì)諾爾斯菌素(NTC)上與糖基部分相連的?-賴(lài)氨酸上的?-氨基基團(tuán)進(jìn)行單乙?;揎?,使得抗生素失活。研究發(fā)現(xiàn),nat1基因在多種異質(zhì)體系內(nèi)發(fā)揮作用,使其在分子遺傳學(xué)中是非常有價(jià)值的選擇性工具。后面陸續(xù)發(fā)現(xiàn)具相同抗性機(jī)理的基因有:來(lái)自大腸桿菌E. Coli的基因stat1,stat2,stat3;來(lái)自鏈霉菌S. lavendulae的stat基因。另外,還有來(lái)自鏈霉菌S. albulus的新型sttH基因,作用機(jī)制不同,抗性在于編碼表達(dá)異分支酸類(lèi)型水解酶,能打開(kāi)streptolidine內(nèi)酰胺環(huán)上的酰胺鍵,將其轉(zhuǎn)化成無(wú)活性的酸性產(chǎn)物。sttH基因抗性似乎只對(duì)酵母菌有活性,對(duì)細(xì)菌無(wú)效。
諾爾絲菌素作為篩選性抗生素的優(yōu)勢(shì):
1. 粉末或者液體的穩(wěn)定性非常高。粉末+4℃保存10年有效,+20℃保存2年有效。
2. 粉末具非常高的水溶性(1g/L);
3. 具非常低或幾乎無(wú)背景抗性:因抗性蛋白僅在細(xì)胞內(nèi)表達(dá),不會(huì)在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)被降解。
4. 不會(huì)與大量其他抗生素,如氨基糖苷類(lèi)抗生素潮霉素B或遺傳霉素G418發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 不能用作診療抗生素,對(duì)臨床上治療的細(xì)菌微生物呈現(xiàn)出極弱抗性。因此與診療抗生素交叉反應(yīng)很小。
6. 特別適用于酵母分子生物學(xué)研究。不像一些營(yíng)養(yǎng)缺陷型選擇性基因,諾爾斯菌素抗性不會(huì)影響酵母正常生長(zhǎng),能用于工程菌,或者缺少營(yíng)養(yǎng)性篩選基因表達(dá)的野生菌
儲(chǔ)存液配制:稱(chēng)量1000mg諾爾斯菌素溶解于5ml去離子水充分溶解后,用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌,即制備200mg/ml儲(chǔ)存液,本溶液置于+4℃保存,至少4周穩(wěn)定,不會(huì)有任何可見(jiàn)的活力損失。長(zhǎng)期保存,分裝凍存于-20℃
篩選濃度:諾爾斯菌素在相對(duì)較低的濃度下即可有效用于重組工程菌的篩選,大多數(shù)有機(jī)體的篩選濃度多在50-200μg/ml區(qū)間內(nèi)。
分子式:C31H58N12O10 C19H34N8O8 H2SO4
分子量:1359.47
CAS: 96736-11-7
純度:95%
保存:-20℃
From RuiTaibio
諾爾絲菌素(NAT/NTC)低抑制濃度和選擇性濃度參考列表
目標(biāo)樣本 |
物種 |
MIC(ug/ml) |
篩選濃度(ug/ml) |
Gram-negative bacreria 革蘭氏陽(yáng)性菌 |
Agrobacterium tumefaciens |
|
100 |
Escherichia coli |
2-12 |
50 |
|
Francisella tularensis |
|
50 |
|
Pseudomonas aeruginosa |
50 |
100 |
|
Gram-positive bacteria 革蘭氏陰性菌 |
Bcaillus subtills |
5 |
50 |
Enterococcus faecium |
8-256 |
500 |
|
Staphylococcus aureus |
2-12 |
50 |
|
Streptomycetes鏈霉菌 |
Streptomyces lividans |
6 |
100 |
Yeast 酵母菌 |
Candida albicans |
200 |
250-450 |
Hansenula polymorpha |
|
100 |
|
Kluyveromyces lactis |
|
50 |
|
Pichia pastoris |
|
100 |
|
Ssccharomyces cerevisiae |
25 |
75-100 |
|
Schizosaccharomyces pombe |
40 |
100 |
|
Other Ascomycota 其他子囊菌 |
Acremonium chrysogemun |
|
25 |
Aspergillus midulans |
|
120 |
|
Cryphonectria parasitica |
|
100 |
|
Neurospora crassa |
|
200 |
|
Penicillium chrysogenum |
|
150-200 |
|
Podospora anserine |
|
50 |
|
Sordaria macrospora |
|
50 |
|
Trichophyton mentagrophytes |
|
50 |
|
Basidiomycota擔(dān)子菌 |
Cryptococcus neoformans |
|
100 |
Schizophylium commune |
3 |
8 |
|
Ustilago maydi |
|
75-100 |
|
Protozoa原生動(dòng)物 |
Leishmania tarentolae,major etc. |
|
100 |
Phyromonasserpens |
|
100 |
|
Plasmodium falciparum |
75** |
|
|
Toxoplasma gondii |
|
500 |
|
Microalgae微藻 |
Phaeodactylum tricornutum |
|
50-250 |
Thalassiosira pseudonana |
|
100 |
|
Plants植物 |
Arabidopsis thaliana |
20 |
50-200 |
Daucus carota |
|
100 |
|
Lotus corniculatus |
|
50 |
|
Nicotiana tabacum |
|
100 |
|
Oryza sativa |
20 |
200 |
|
MIC:Minimal inhibitory concentration IC50:Concentration inhibiting growth by 50% |
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