免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(western blot),它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。western blot是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡(western blot)常用于鑒定某種蛋白,并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。
服務(wù)要求:
1. 樣品要求:
組織樣品:每份樣品約(250~500mg)新鮮或正確保存的,
細(xì)胞樣品:每份樣品約1×106~1×107細(xì)胞數(shù)
2.客戶需提供有效的一抗,或由公司代購進(jìn)口原裝抗體,
3.客戶需提供欲檢測(cè)目的蛋白的詳細(xì)背景資料。
操作程序:
1.總蛋白制備
2.比色法測(cè)定蛋白含量
3.變性聚不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE) 凝膠電泳,分離蛋白質(zhì)
4.蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印電泳印跡法
5.固相免疫檢測(cè):封閉、一抗雜交、二抗雜交
6.化學(xué)發(fā)光法檢測(cè):顯色、曝光、顯影定影
7.結(jié)果數(shù)據(jù)分析:膠片掃描,軟件分析
8.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)圖表。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
每張膜上做一種目的蛋白和相應(yīng)的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個(gè)樣品(樣品數(shù)小于8個(gè)按8個(gè)計(jì))。每張膜的費(fèi)用是:1500.00元。一抗另計(jì),其它試劑免費(fèi),一抗訂購時(shí)間約為3周。
時(shí)間:約2-3周(不包含代購抗體的時(shí)間)。
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